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                1. 禽病診斷試劑盒 豬病診斷試劑盒 牛羊病診斷試劑盒 病原學診斷試劑 霉菌毒素試劑盒

                  T2 毒素 【名稱】T2毒素
                  【英文名稱】T2 Toxin
                  【品牌】美國AFFINITECH
                  【貨號】T-2-0100
                  【規格】96*1/盒

                  實驗原理

                  T-2毒素試劑盒是一種競爭性酶聯免疫分析法。將研磨樣品與70 %的甲醇震蕩提取T-2毒素。提取物過濾,并進行免疫分析。然后加入T-2毒素辣根過氧化物酶結合物,隨后加入T-2毒素抗體開始反應。孵育10min后,樣品中的T-2毒素與 T-2毒素辣根過氧化酶結合物競爭性與檢測孔中的T-2毒素抗體。孵育 10 min 后,棄去內容物,吸取未結合的酶標記毒素。加入顯色底物,酶與毒素結合物顯藍色。孵育5min,反應終止,測定每個孔的顏色。未知樣品的顏色與校準物的顏色相比,得出樣品中T-2毒素的濃度。

                  使用目的

                  T-2毒素試劑盒是競爭性ELISA反應,用于定量檢測玉米、玉米粉、玉米胚芽粉、玉米麩粉和玉米大豆粉中的T-2毒素。

                  樣品及標準品的準備

                  注意:必須根據建立的采樣方法采集樣品

                  1. 準備提取溶液(70%甲醇):70 ml的甲醇中加入30 ml的蒸餾水或去離子。

                  2. 將樣品磨碎至能夠即溶的顆粒(50%的能夠通過20目的網篩)。

                  3. 秤取 20g磨碎的樣品,加入100ml的提取溶液(70%甲醇)。

                  4. 在密閉的容器或攪拌機中震蕩混合2-3分鐘。待顆粒沉降后,將15ml的提取物用Whatman1號濾紙過濾,收集濾液待測。

                  5. 將樣品與標準品按1:10的比例用蒸餾水或去離子水稀釋。(注意:由于谷物樣品在提取的時候已經按1:5稀釋,因此標準品實際上是設定值的1/5,最初的谷物樣品濃度不需要進一步的回調)

                  實驗步驟
                  注意:建議采用多道的移液器進行實驗。如果使用單道的移液器,建議樣品和標準總共不超過16個(2條)。(注意:對校正品和樣品設置重復孔可以提高實驗的精確度)

                  1. 使用前所有的試劑恢復至室溫。

                  2. 將使用的測試孔放置在微孔架上。確保未使用的微孔放入有干燥劑的自封袋中。

                  3.  每個稀釋孔中加入50μl的酶結合物。

                  4. 向稀釋孔中加入50μl的按1:10稀釋的標準品和樣品,每孔換新槍頭。注意:在實驗過程中實驗員必須標記每個標準品和樣品的位置。

                  5. 每個孔中加入50μl的兔抗T-2抗體溶液。

                  6. 室溫孵育10min

                  7. 將內容物倒入廢液瓶中,每個微孔加滿蒸餾水或去離子水,清洗微孔,然后將微孔中的水倒入廢液瓶中。反復清洗5次。

                  8. 將微孔口朝下在吸水紙上拍打,去除剩余的水。期間不能使微孔風干。

                  9. 在每孔中加入2滴(或100μl)的底物。室溫下孵育5分鐘。

                  10. 每個微孔中馬上加入2滴(或100μl)的終止液。按照與加入底物相同的順序相同的位置,加入終止液。

                  11. 利用酶標儀,在450nm處測定并記錄每個微孔的吸光度值(OD)。

                  結果判讀

                  定量判讀需要在半對數坐標紙上繪制標準品的吸光度值(Y軸)與標準品濃度(X軸)的坐標圖。將標準品的點連成直線,樣品的吸光度就在線上,與之對應的X軸上的點就是樣品的濃度。樣品的吸光度小于最高的標準值時記為>500ppb